表2 猪场废水生物处理过程中抗性基因的赋存特性
除厌氧消化工艺以外,氧化塘、人工湿地也是畜禽养殖场广泛使用的废水处理工艺.Joy等.调查了氧化塘储存猪场废水40 d抗性基因的变化,ermB和ermF的丰度分别降低了50%~60%和80%~90%,而tetX和tetQ丰度的消减符合一级反应动力学模型.将氧化塘处理猪场废水后抗性基因的去除趋势归为两类,一类是相对丰度大幅降低甚至低于检测限,包括tetB、tetL;另一类为经处理后丰度不变甚至有所提高,包括tetG、tetM、tetO和tetX,可能因为这类基因常位于转移原件上,在废水中发生了基因的水平转移.郑加玉等采用水平流人工湿地处理猪场废水,结果表明tetW、tetM和tetO的浓度平均去除率分别为95.73%、92.21%和95.05%;可能由于土壤对抗性基因的吸附作用,湿地土壤中抗性基因的丰度有明显升高现象.Liu等模拟垂直流人工湿地中添加沸石研究抗性基因的消减规律,发现在HRT为30 h时猪场废水抗性基因去除效果较好.
4.2 膜生物反应器(Membrane bioreactor,MBR)工艺
膜分离技术近年已在畜禽养殖废水处理领域得到了一定的研究与应用,并日益得到重视.例如,Padmasiri等采用厌氧MBR处理猪场废水,有机负荷为1.0 kg ˙ m-3 ˙ d-1高于其他厌氧消化工艺采用好氧MBR处理猪场厌氧消化液TN负荷0.11 kg ˙ m-3 ˙ d-1较高.然而针对MBR处理畜禽养殖废水抗性基因去除规律的研究较少.Du等调研了污水处理厂采用A2OMBR工艺处理生活和工业混合废水对四环素类和磺胺类抗性基因的去除效果,结果表明MBR工艺对tetG、tetW、tetX、sul1和intI1分别去除了2.20、2.90、1.71、2.15和2.07 log copies ˙ mL-1,膜出水抗性基因丰度仍然较高(2.85~4.97 log copies ˙ mL-1),然而作者并未给出膜孔径等膜分离工艺参数.
同常规生物处理工艺相比,MBR的生物量高,可能存在较大的抗性基因水平转移风险.Yang等以RP4质粒作为水平转移研究对象,研究了MBR中抗性基因的水平转移效率,结果表明RP4在MBR中维持较高丰度104 copies/mg ˙ biosolid,具有较高的水平转移效率(2.76×10-5/recipient),而RP4在常规活性污泥法的水平转移效率约4×10-6 /recipient;尽管存在较高的水平转移效率,但由于微滤膜(PVDF,0.22 μm)的截留作用,出水检测不到携带抗性基因的RP4.由于膜的截留,一方面可消减膜出水的抗性基因浓度,另一方面导致反应器内污泥浓度高,可能使抗性基因在反应器内积累,提高了污泥中抗性基因的水平传播.污泥是重要的抗性基因蓄积库,经过堆肥或厌氧消化处理后作为肥料土地利用,污泥的土地利用存在抗性基因的污染隐患.
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