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从原理上说,这一检测方法以使蚀斑数减少50%的血清稀释度作为其中的效价。试验使用定量的病毒(100PFU)与不同稀释度的等量血清混合后感作, 接种预先准备好的单层细胞,再覆盖上营养琼脂置37度二氧化碳培养箱培养,数天后分别统计蚀斑数,用Karber法计算该血清的蚀斑中和效价。
患者的血清中混有病毒,几天时间里研究人员观察病毒是否会感染培养基,如果没有,那么病毒就已经被血清中的抗体中和了,这表明患者曾经接触过寨卡病毒。
CDC甲类病毒实验室主任Ann Powers表示,使用这种方法的问题在于“你必须有活体病毒,和合适安全的环境,”这意味着只有少数几个实验室能进行这种试验。
其它更加方便的血清学测试也能检测特定病原体中的抗体,但是对于寨卡病毒来说,很难判断患者携带的黄病毒是登革热病毒,寨卡病毒还是其它病毒。“而且寨卡病毒出去的区域也正是登革热出现的地区,”来自华盛顿大学圣路易斯分校的免疫学家Mike Diamond说。
Vasilakis 正在尝试ELISA方法,也就是检测体液中微量物质的固相免疫测定的方法,这种方法利用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定,可以在感染后几个星期内检测到Zika病毒。虽然这也有可能会与其它感染发生一定程度的交叉反应,但如果Zika病毒特异性抗体浓度高就能指示出近期发生的Zika病毒感染,Vasilakis说。
Vasilakis预计在未来几周内,Diamond研究组就会有结果,研发出一种针对Zika病毒的单克隆抗体检测方法,这能与ELISA方法结合,检测发生过的感染,“我们很早就开展了这项研究,这个月就能得到结果,”Diamond说,“初步结果表明我们的一些抗体能特异性识别Zika病毒。”
不过即使Diamond研究组的抗体能特异性检测Zika病毒,他们也需要一些时间来建立诊断方法,“这可能还需要几个月的时间。”
与此同时,一些生物公司也开始销售Zika血清学检测,比如MyBioSource 公司已经有售一种针对Zika的IgM ELISA检测,来自加拿大的Biocan 公司也在出售一种检测IgM和IgG抗体(后者比前者在感染后提升水平更高)的扎手指检测方法,能在5到10分钟得到结果。
Diamond表示他们还未接触任何商业产品,Biocan目前还未给出有效数据,但是其销售部总经理Bhavjit Jauhar表示他们已经将实验室和现场检测结果呈递给巴西监管当局,“我们过去几年间一直致力于Zika病毒的研究,因为我们认为这种疫情会暴发。”
本文来源:综合现代检验医学杂志&国际检验医学杂志
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