从图 4看出,原工况稳定阶段,空白组与BPA对照组水相COD在单个SBR周期内随时间变化趋势相似,具体为:水相COD到第4 h已降至50 mg ˙L-1以下; 但第8 h开始,两组SBR水相COD略有回升,但仍维持在50 mg ˙L-1左右.缩减HRT和SRT到稳定阶段后,在1个SBR运行周期内,空白组与对照组SBR水相COD下降趋势与改工况前类似,在第4 h降至最低并一直稳定在35 mg ˙L-1左右; 且空白组水相COD下降速率和幅度更显著,这说明改变工况更利于空白组SBR系统处理废水效能.
2.3.2 不同工况下BPA对照组单周期内BPA浓度变化
对比两个工况条件稳定时BPA对照组水、 泥相中BPA含量在1个SBR周期内的变化趋势,如表 3所示.
表 3 两工况条件稳定阶段40 mg ˙L-1BPA组污泥单周期内水相和泥相BPA浓度变化 1)
从表 3可知,两种工况稳定阶段,对照组泥相BPA含量均低于检测限; 水相BPA在3 h内可被完全降解; 改变工况后BPA在水相中的降解速率低于原工况,但不影响出水效果.分析认为,原工况条件经高浓度BPA驯化,对照组污泥相已存在大量可有效降解BPA的优势菌群,因HRT和SRT较长,大量代谢速度慢,世代周期长的菌群可以存活,故污泥相菌群组成较为丰富、 生物相较完善; 而缩短HRT和SRT后,污泥相中微生物菌群结构发生改变,主要以代谢速度快,世代周期短的微生物为主[23,24,25,26],因缺乏不同菌群间“产物抑制”的消除效应,形成较多中间降解产物,一定程度上抑制了BPA总体去除速率,故BPA在系统中降解去除速率较原工况条件稍慢.
2.3.3 不同工况条件稳定期BPA对照组单周期内的污泥毒性变化
图 5所示,原工况条件当活性污泥系统达到稳定阶段,由于系统内已大量存在有效降解BPA优势菌群,因此污泥总毒性抑制率在2 h处较低,为36.97%; 通过BPA优势降解菌作用,第2~6 h污泥总毒性抑制率持续下降至最低点不足30%; 随后污泥总毒性波动上升,在周期末第12 h达42.75%,高于周期初始第2 h时的毒性值.经分析,认为污泥总毒性在6 h后出现波动且重升至高点的原因是:一方面由于进水BPA含量较高,微生物降解过程中产生有毒副产物量多,毒性大,不能被微生物吸收和进一步降解为无毒物质,因此毒性有累积; 另一方面由于系统在第6 h后停止曝气,系统溶解氧降低,微生物降解BPA及其有毒副产物速度减慢,效率降低,且产生大量SMP等难降解物质造成毒性升高.
图 5 两工况条件稳定阶段单周期内污泥总毒性抑制率变化趋势对比
调整工况条件缩短HRT和SRT后,系统内污泥总毒性抑制率从第0. 5 h开始逐渐增加至第1.5 h,随后又单调下降且在第4 h处达到稳定,直至周期结束维持在30%附近.同时对比第2 h时的污泥总毒性抑制率改工况后为45.7%,高于原工况时的36.97%; 分析认为,由于HRT缩短,并保持进水COD和BPA含量不变,污泥负荷升高,因此相同2 h内降解BPA所产生的污泥毒性有所增加.改变工况后周末第8 h系统内污泥总毒性抑制率为32.56%,明显低于原工况第12 h时的42.75%.说明处理高浓度BPA模拟废水的SBR污泥系统,缩短HRT和SRT不仅筛选了代谢速率快,世代周期短的BPA降解菌,且微生物活性也显著增强,加快了系统中毒性残留物质的消耗,污泥总毒性削减明显,从而降低剩余污泥后续处理处置及资源化利用的成本和环境风险.
2.4 污泥总毒性与微生物群落之间的相关性分析
有机物对微生物菌群的生物多样性和变异特性的影响是复杂的[27].活性污泥降解BPA及其有毒副产物过程中产生了污泥毒性,势必导致污泥相微生物菌群发生变化.通过PCR-DGGE分析技术,对两SBR污泥相微生物群落结构的多样性和相似性进行研究,得出菌群多样性与污泥总毒性间的相关性信息,分述如下.
2.4.1 香农-威尔指数(Shannon-Weaver diversity index)与污泥总毒性之间的相关性分析
Shannon-Weaver diversity index (H)是一种常用的评估微生物多样性的指标[28],公式为:
式中,ni为Band i的峰值,i为一条DGGE条带Lane上的Band的排序,N为此条带Lane上所有Band的峰值总和.应用香农-威尔指数的显著优势就是可以综合考虑菌种数量(number of species)和物种均匀度(evenness of given community); H值越大,说明微生物群落多样性越高.
由表 4可知,原工况条件稳定阶段40 mg ˙L-1 BPA对照组(3号)污泥系统微生物多样性(H=3.72)大于空白组(1号)污泥系统(H=3.59); 说明相对于空白组污泥,BPA对照组由于进水中含有高浓度BPA,污泥系统内微生物受到BPA驯化而产生降解BPA的优势菌群,同时对照组污泥中含有蛋白胨降解菌,故BPA对照组内的微生物多样性高于同时期的空白组污泥.而改变工况条件并重新到达稳定期后,空白组(2号)污泥微生物菌群多样性明显增加(H=3.88),而40 mg ˙L-1BPA对照组(4号)则有所降低(H=3.67).结合2.2节中所得污泥毒性抑制率的变化趋势,即缩短HRT和SRT后,空白组和BPA对照组的污泥总毒性均明显降低.试验说明,新工况条件下空白组污泥微生物多样性增加,对降解有机物过程中产生的污泥毒性进行消耗,因此空白组污泥总毒性与微生物菌群多样性呈负相关关系,即污泥毒性抑制率随菌群多样性的增加而降低.40 mg ˙L-1BPA对照组改变工况条件后,污泥总毒性和微生物菌群多样性都出现降低,即二者呈正相关性关系.分析原因为改变工况条件筛选了40 mg ˙L-1BPA对照组污泥中谢速率快、 世代周期短的降解蛋白胨和BPA的优势菌,而部分代谢速率慢且世代周期长的BPA及其中间产物降解菌被淘汰,由此降低了系统内微生物的物种均匀度.且由于缩短了HRT和SRT,污泥负荷增加、 污泥活性也相应增强,筛选所得优势菌群对BPA及其降解过程中产生毒性物质的消耗速率较快,致使污泥毒性的消减.
表 4 两工况条件稳定阶段污泥样品总毒性抑制率和香浓-威尔指数分析
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