你的高效液相色谱柱“任性”吗？-北极星环境监测网

投稿

我要投稿

色谱柱是高效液相色谱的核心部件。它主要起到了分离作用。色谱柱同样也是一个消耗品，在流动相冲刷的过程和样品在分析的过程，填料损失和污染使得色谱柱的性能慢慢下降。所以，对于高效液相色谱尤其是常用的C18柱，需要在一定时间内对其性能做一个评估，同样，新的色谱柱也要对色谱柱做一个有效的体检。这个体检就是评估色谱柱的性能。

在讲评估色谱柱性能之前，青青草老师讲一段自己的经历。

曾经在07年我在一家仪器公司从事装色谱柱工作，是商品柱哦。主要是3微米，5微米，10微米C18分析柱子，其中前两个颗粒大小的色谱柱是分析型色谱柱。反相色谱柱最一般的规格型号是4.6mm内径，150mm，250mm长度，颗粒度一般有3微米，5微米，其中5微米比较多。当然还有其他规格长度的色谱柱，这里就不再展开讲述了。色谱柱主要是两端封有筛板柱头，中间的空心不锈钢管子中装有填料。这些填料主要作用就是吸附样品，同样，在流动相推动下，混合样品中各物质由于结构性质不同，从而使得他们被吸附脱附的能力不同，被分离。

高效液相色谱柱，尤其是C18的反相色谱柱是通过高压匀浆的方法装填的。

通过匀浆液使得色谱填料均匀悬浮在匀浆管中，匀浆管下面装有一根空的色谱管，这根色谱管底部用柱头和筛板固定，通过泵的瞬间高压，流动相将色谱填料填压入色谱管，稳定片刻后，另一头装上筛板和柱头，即可。由于装填色谱柱受到很多的因素影响，所以，不是每一根色谱柱都是能够装填好的，所以，新的色谱柱要通过测试其性能，其性能符合要求，才能够销售。

而我们客户呢，对于购置的新色谱柱，首先需要测试其性能，包括有效塔板数，拖尾因子。这个是最重要的指标。如果这些指标符合要求，那么这根色谱柱是OK的。大家知道，有些小公司没有HPLC，他们销售的色谱柱有可能是不好的，所以，对新色谱柱建立性能档案是很有必要。如果不合格的新色谱柱，立即向供应商调换，才能够保证你的权益。

那么如何测试色谱柱性能呢？

这里qingqingcao老师给出两个基本的公式。有效塔板数，拖尾因子。

1.有效板数塔

在我们学习色谱理论时候，我们讲过理论塔板数，有效塔板数。这里我不再讲述公式如何来的。我们这里打个比方，现在我手头有两个同样长度，同样内径，同样填料,填料的颗粒度相同的C18色谱柱,一根装的紧，一根装的松，那么大家认为你会选哪根？答案是必然的，当然首选紧的那根。原因是装的紧的那根色谱柱，单位体积内填料多，填料多那么分离效果就好，而松的那根，单位体积填料少，那么分离效果就显得差。那么如何判断相同规格型号长度的色谱柱填料填的多寡，那么就需要用到有效塔板数了。也就是说，通过相同条件下测试同一物质，有效塔板数多的那根色谱性能高，填料填的多，反之就是不好的那根。

我们首先给出公式：

其中，to是死时间，也就是物质不被保留，在色谱系统中走过的时间。一般可以认为进样冲击是死时间。或者剪一根和色谱柱相同长度的空管，装在色谱柱位置，以纯水为流动相，相同流速，进甲醇，以254nm为检测波长，出来峰的那个时间一般认为是死时间。这个方法确实比较粗糙，但是管用。

我们看下公式，相同浓度同一物质，相同色谱条件下，如果半峰宽一致的情况下，某物质被保留的时间越长，则有效塔板数越多。试想，色谱柱越长，填料相同内径相同，装填效果相同的条件下，长的色谱柱必定性能好。

同样，色谱样品条件相同的情况下，半峰宽越窄，色谱柱越好。也就是说，填料装的越紧越好。

其中tm-t0是调整保留时间。W1/2h是半峰宽。

原标题：你的高效液相色谱柱“任性”吗？

投稿与新闻线索：电话：0335-3030550，邮箱：huanbaowang#bjxmail.com（请将#改成@）

订阅北极星周刊，精彩内容不再错过！

特别声明：北极星转载其他网站内容，出于传递更多信息而非盈利之目的，同时并不代表赞成其观点或证实其描述，内容仅供参考。版权归原作者所有，若有侵权，请联系我们删除。

凡来源注明北极星*网的内容为北极星原创，转载需获授权。

阅读下一篇

【组图】好消息！从15日起这些钱可以省了！

高效液相色谱查看更多>色谱柱查看更多>仪器公司查看更多>

姓名：
性别：
出生日期：
邮箱：
所在地区：
行业类别：
工作经验：
学历：
公司名称：
任职岗位：

你的高效液相色谱柱“任性”吗？

【组图】好消息！从15日起这些钱可以省了！

登录注册

绑定账号

想要获取更精准资讯推荐？建议您完善以下信息~

订阅成功

想要获取更精准资讯推荐？建议您
完善以下信息~